Abstract
<jats:p>In dieser Studie wurden extrazelluläre Vesikel aus Kuhmilch (mEVs) durch eine Kombination mehrerer schonender Aufreinigungsschritte isoliert. Nach enzymatischer Kaseinentfernung mittels Chymosins folgten Filtration, Tangentialflussfiltration (TFF) und Größenausschlusschromatographie (SEC), wodurch eine effektive Abtrennung von Kaseinaggregaten und anderen Milchbestandteilen erreicht wurde. Die deutliche Abreicherung der Kaseinproteine konnte durch SDS-PAGE-Analysen nachgewiesen werden. Die Identität und Integrität der isolierten mEVs wurde anschließend durch SEC-Profile, digitale PCR-Analysen spezifischer microRNAs (let-7a, miR-21) sowie Atomkraftmikroskopie (AFM) bestätigt. Die Quantifizierung von RNA-, DNA- und Proteingehalten erfolgte mittels Fluoreszenzfärbungen und Qubit-Messungen. Insgesamt zeigen die Ergebnisse, dass die kombinierte Anwendung dieser Verfahren eine reproduzierbare und schonende Anreicherung biologisch relevanter Milchvesikel ermöglicht.</jats:p>